卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)是一种经典的实验室抗原,被广泛应用在免疫学、过敏反应、疫苗研发及疾病模型研究领域。在建立包括大鼠模型在内的免疫研究过程中,抗卵清蛋白IgG3(OVA-IgG3)抗体检测 是研究大鼠机体免疫响应的一项关键指标。为满足科研工作者的实际需求,优品生物倾心推出大鼠抗卵清蛋白IgG3抗体检测(OVAlgG3)检测试剂盒,该试剂盒以操作简便、结果可靠和性能稳定著称,成为研究实验中的理想选择。本文将详细介绍试剂盒的用途和使用说明,以帮助科研人员快速掌握。
优品生物大鼠抗卵清蛋白IgG3抗体(OVA-IgG3)检测试剂盒是一款基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理研发的定量检测工具,旨在检测大鼠血清、血浆或其他样本中抗卵清蛋白IgG3抗体的存在和水平。此试剂盒适用于免疫反应研究、疫苗效能评价及抗体动力学分析 等多种领域,为科学家提供快速、精准的实验结果支持。
试剂盒使用说明
优品生物大鼠抗卵清蛋白IgG3抗体检测试剂盒经过优化,在灵敏度、特异性和简便性上均表现卓越。以下是试剂盒的详细使用说明:
1. 试剂盒组成及准备
所有试剂均提供即用型或预配方案,科研人员可直接使用,减少了实验前的复杂步骤:
- 酶标板 :已包被卵清蛋白(OVA)的96孔酶标板。实验前无需进一步包被和处理,可直接使用。
- 标准品 :预制的OVA-IgG3抗体标准品系列,提供多种稀释浓度,方便绘制标准曲线。
- HRP标记二抗 :即用型抗体酶联物,特异性结合OVA-IgG3,信号放大稳定可靠。
- 显色底物(TMB) :优化显色效果,易于观察并兼容分光光度计测定。
- 终止液(Stop Solution) :停止显色反应,提供精准的读数信号。
- 洗涤液 :10×浓缩洗涤缓冲液,实验前按照操作手册稀释为1×使用。
实验前准备:
- 按操作说明将浓缩洗涤缓冲液稀释成1×洗涤液。
- 标准品按指定稀释梯度准备好6~8个标准点(具体浓度范围详见说明书)。
- 将实验所需试剂从冷藏温度恢复至室温(避免反复冻融)。
2. 样本处理
- 适用样本类型 :建议使用大鼠血清、血浆或细胞培养上清液。
- 样本处理要求 :离心去除颗粒物,避免脂血样本。建议事先稀释样本至适合浓度范围(具体可参考说明书指南)。
3. 实验步骤
(1)试剂加载
将包被好的OVA抗原酶标板从包装袋取出,根据说明书设计好实验布局:
- 每一标准品浓度点设置复孔;
- 样品和空白对照均建议重复设置,以确保数据的可靠性。
按照以下比例加样:
- 标准品孔 :加入100 μL标准品溶液。
- 样本孔 :加入100 μL待测样本。
- 空白孔 :加入100 μL样本稀释液,作为背景对照。
(2)孵育
酶标板用封板膜密封后,置于37°C恒温孵育箱中孵育60分钟。此步骤可帮助抗体与卵清蛋白充分结合,从而提高检测的灵敏性和特异性。
(3)洗板
结束孵育后,进行洗板:
- 每孔加入300 μL 1×洗涤液,随后甩干;
- 重复5次,确保未结合的杂质完全清除。
(4)加入HRP标记二抗
每孔加入100 μL即用型HRP标记的二抗,置于37°C孵育30分钟以放大捕获信号。
(5)显色反应及终止
- 每孔加入100 μL TMB显色溶液,37°C避光孵育10分钟(根据颜色深浅调整孵育时间)。
- 加入100 μL终止液后读取450 nm吸光值(可使用酶标仪读取数据)。吸光值与样本中抗体浓度成正相关,可由标准曲线计算样本中抗体浓度。
4. 数据分析
- 标准曲线绘制 :以标品浓度为横坐标,吸光值(OD450)为纵坐标,绘制标准曲线;
- 样本浓度计算 :通过样本吸光值在标准曲线中查找对应浓度,获得样本IgG3抗体的水平。
产品优势
操作简便,省时高效
本试剂盒提供即用型酶标板及优化试剂,所有步骤清晰明确,无需繁杂的前期准备,快捷高效且适合初学者使用。
高灵敏度与特异性
- 精选高纯度卵清蛋白作为捕获抗原,与目标抗体高度特异结合;
- 优化的洗板体系有效减少背景噪声,信噪比更高,检测限精准到 pg/mL 级别。
稳定性强,结果一致
经过严格质控,试剂盒各组分在有效期内稳定可靠,多批次之间结果一致性高,为实验数据的重复性提供保障。
适用范围广,兼容多类型实验
无论是基础研究、中高通量筛选还是疫苗免疫反应分析,该试剂盒都能为您提供精准结果,是理想的科研工具。
适用领域及实际应用
- 疫苗免疫学研究 :测定疫苗引起的IgG3抗体水平,为免疫效能评估提供关键数据;
- 过敏反应机制研究 :分析OVA-IgG3在过敏反应中的变化,辅助揭示病理机制;
- 药物开发和免疫调节剂筛选 :监测药物对免疫模型的调控作用。